ヒト滑膜組織由来細胞
１．ご案内
 
培養３日後
滑膜細胞は、関節リウマチ、変形性関節症において異常増殖し、関節破壊に関与することが知られており、病態解明のための有用な研究試料です。

当バンクは、関節リウマチ、変形性関節症由来滑膜から調製した研究用滑膜細胞を凍結状態で譲渡しております。
２．譲渡可能な滑膜細胞（凍結）
 

資源番号 提供者 細胞数/本 解凍直後の生存率(*1) 本数 疾患名(摘出関節部位)
HT47768187 女性（60才代） 5.9 x 105 >90％ 29本 関節リウマチ（膝）
HT21116879 女性（70才代） 4.5 x 105 >90％ 12本 関節リウマチ（足）
HT48104309 女性（70才代） 3.5 x 105 >90％ 37本 関節リウマチ（股）
HT29274412 女性（70才代） 4.3 x 105 >90％ 95本 関節リウマチ（手）
HT64754967 女性（70才代） 3.5 x 105 >90％ 62本 関節リウマチ（手）
HT42791974 女性（70才代） 5.0 x 105 >90％ 93本 関節リウマチ（膝）
HT51213801 女性（60才代） 6.5 x 105 >90％ 91本 関節リウマチ（膝）
HT00856686 女性（70才代） 4.0 x 105 >90％ 92本 関節リウマチ（膝）
HT32251238 女性（60才代） 6.5 x 105 >90％ 92本 関節リウマチ（膝）
HT42487497 女性（60才代） 3.5 x 105 >90％ 19本 関節リウマチ（膝）
HT61897949 女性（70才代） 5.0 x 105 >90％ 90本 関節リウマチ（膝）
HT91989516 女性（60才代） 5.0 x 105 >90％ 49本 変形性関節症（膝）
HT26167661 女性（70才代） 7.0 x 105 >90％ 98本 変形性関節症（膝）
HT65558941 女性（80才代） 5.0 x 105 >90％ 40本 変形性関節症（膝）
HT50184366 女性（80才代） 4.5 x 105 >90％ 40本 変形性関節症（膝）
HT40754596 男性（70才代） 5.0 x 105 >90％ 65本 変形性関節症（膝）
HT75505908 女性（70才代） 4.5 x 105 >90％ 40本 変形性関節症（膝）

(*1)バイアルを微温湯で解凍した直後にトリパンブルー染色し、計数した細胞数から求めた数値です。解凍翌日の生存率・接着率はこの数値より低下いたします。

譲渡お申し込み方法につきましては、ヒト組織バンクご利用の手引きをごらん下さい。

３．由来組織
 
  • 日本人
  • 人工関節置換手術で摘出された滑膜組織
  • 梅毒、HCV、HBV、HIV検査結果は陰性
  • 遺伝子解析研究への利用は可能
４．細胞の調製（HSRRBにて実施）
滑膜組織
↓
細胞分離処理（コラゲナーゼ消化、細胞分散）
↓
ろ過(250μm)
↓
遠心分離
↓
フラスコへの細胞播種、サブコンフルエントまで培養
↓
0.25% トリプシン / 0.02% EDTAで継代、培養
↓
セルバンカーに懸濁
↓
プログラミングフリーザーにて緩慢凍結
↓
液体窒素タンクに保管

５．細胞の性状検査（HSRRBにて実施）

  • 使用機材

    • 培養器質：Nunc マルチディッシュ4 well（Code No.: 176740）
    • 培養培地：Dulbecco's modified Eagle medium（ニッスイ, Code No.: 05919）＋ 10% FBS
    • 培養器質：Nunc マイクロウエルプレート96 well（Code No.: 167008）
    • ELISAキット：Quantikine Human MMP-3 (Total) (R&D Systems, Cat No.: DMP300)

  • 解凍直後の全細胞数、生細胞数： トリパンブルー色素排除法

  • 増殖確認（図１）

  • 全てのロットについてTNF-α添加時のMMP-3産生促進を確認（図２）

  • 間葉系幹細胞としての分化能を確認中（図３）

  • 微生物汚染検査（細菌・真菌・マイコプラズマ）： 陰性を確認

【図１】解凍後の細胞増殖
培養１日後
培養１日後

培養３日後
培養３日後

【図２】TNF-α添加 によるMMP-3産生への効果の確認例

MMP3グラフ
(*)MMP-3産生量はロットにより差がございますが、対照群と比較して数倍以上の差があることを確認しています。

【図３】滑膜細胞の脂肪細胞／骨芽細胞への分化確認例
1．脂肪細胞への分化確認例
脂肪細胞分化誘導前
分化誘導前

脂肪細胞分化誘導後
分化誘導後

oil red O染色像
Oil red O染色像

2．骨芽細胞への分化確認例
コントロール
アルカリフォスファターゼ活性染色像（コントロール）

アルカリフォスファターゼ活性染色像
アルカリフォスファターゼ活性染色像（分化誘導した培養）

アリザリンレッド染色像
アリザリンレッド染色像

関節リウマチ由来滑膜細胞のTNF-α反応性に関する性状確認方法・結果の詳細につきましては、誌上報告を行っております。合わせてご参照下さい　（文献へのリンク [JSTAGE] )。

Kasamatsu, A., Satoh, M., Yoshida, T. and Kosaka, T.
Response of human fibroblast-like synoviocytes derived from rheumatoid arthritis to inflammatory stimulation: quality control findings.
Tissue Cult. Res. Commun. 29: 167-172 (2010)